@MASTERSTHESIS{ 2016:1213341419, title = {Os efeitos biológicos da laserterapia de baixa intensidade em células-tronco isoladas da papila apical humana}, year = {2016}, url = "http://tede.bc.uepb.edu.br/jspui/handle/tede/3056", abstract = "O objetivo deste trabalho consistiu na análise dos efeitos da laserterapia de baixa intensidade (LBI) na atividade biológica de células-tronco isoladas da papila apical (SCAPs). Foram utilizadas células-tronco isoladas da papila apical doadas pelo banco de células do Laboratório de Nanotecnologia Farmacêutica e Sistemas de Liberação de Fármacos da Universidade Federal de Goiás (UFG). As células foram cultivadas em garrafas de 75cm^2 e mantidas em estufa umidificada a 37°C em atmosfera saturada em 5% de CO2. Foi utilizado meio de cultura padrão composto por Dulbecco's modified Eagle's medium nutrient mixture F-12 (DMEM/F12), soro fetal bovino a 10%, 100 µg/mL de estreptomicina e 100 U/mL de penicilina. Para irradiação, foi utilizado o laser semicondutor diodo (InGaAlP), no comprimento de onda de 660 nm, potência de 100mW, energia de 6J, tempo de irradiação de 60 segundos. Inicialmente, foi avaliada a intensidade do metabolismo mitocondrial por meio de imunofluorescência com o uso do Mitotraker Red. Foram comparadas as intensidades de atividade mitocondrial em células não irradiadas, e após dois tempos de irradiação: imediato à aplicação do LBI e 24h após a aplicação. Com o intuito de avaliar a imunoexpressão de proteínas reguladoras, foi realizada imunocitoquímica, empregado os marcadores Ki-67, Ciclina B1, TGF-β2 e TGF-β, p53, Bcl-2. Para cada anticorpo, foram analisados dois grupos distintos de células: um não irradiado (CNT) e outro irradiado (G6J). A análise da progressão do ciclo celular foi realizada no tempo de 8h por meio da marcação com Iodeto de Propídeo, as células foram quantificadas de acordo com a fase do ciclo em que se encontravam, por meio de citometria de fluxo. Foram comparados os resultados obtidos nos grupos irradiados e não irradiados. A normalidade de distribuição dos dados foi testada utilizando o teste de Kolmogov-Sminorv. . Para verificar as diferenças nos percentuais de imunoreatividade, foi utilizado o teste de Mann- Whitney e para verificar se houve diferença estatística entre os grupos quanto a progressão do ciclo celular, foi utilizado o teste T não paramétrico. Em ambos os casos, foi adotada significância de 5%. O aumento da atividade mitocondrial foi evidente desde o momento imediato da irradiação, sendo este aumento metabólico ainda maior após 24h de exposição ao LBI. As células irradiadas com LBI vermelho apresentaram maiores medianas de percentuais de imunopositividade ao Ki-67 e a Ciclina B1. Não houve diferença quanto à expressão de TGF-β. Da mesma forma, também não foi obtida diferença quanto à imunoexpressão do p53 e Bcl-2, o que indica que o LBI não desregula genes importantes na manutenção da progressão do ciclo celular e controle da apoptose. Também não houve divergências quanto à cronologia da progressão do ciclo celular entre os grupos irradiados e não irradiados. Desta forma, é possível concluir que a absorção da luz pelas SCAPs resulta em aumento imediato do metabolismo mitocondrial que pode influenciar a maior expressão do marcador de proliferação nestas células. Também foi demonstrado que a irradiação destas células não resulta em nenhum dano à regulação das funções vitais de proliferação celular e apoptose.", publisher = {Universidade Estadual da Paraíba}, scholl = {Programa de Pós-Graduação em Odontologia - PPGO}, note = {Pró-Reitoria de Pós-Graduação e Pesquisa - PRPGP} }